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蘭伯艾克斯|二氧化碳培養(yǎng)箱:細(xì)胞培養(yǎng)小科普

更新時(shí)間:2023-07-17點(diǎn)擊次數(shù):801


二氧化碳培養(yǎng)箱:細(xì)胞培養(yǎng)小科普


圖片


大家有沒(méi)有試過(guò),把培養(yǎng)基凍起來(lái),顏色會(huì)有變化嗎?顏色一開(kāi)始變黃!解凍以后,又會(huì)慢慢變紅!為什么呢?


1

如果凍的液體是水,或是緩沖液,顏色會(huì)有變化嗎?

并不會(huì)有變化!


原因是因?yàn)椋囵B(yǎng)基中會(huì)加入酸堿指示劑,例如酚紅,用于檢測(cè)培養(yǎng)基的酸堿性。當(dāng)培養(yǎng)基酸性增加時(shí),酚紅會(huì)呈現(xiàn)黃色,當(dāng)培養(yǎng)基堿性增加時(shí),酚紅會(huì)呈現(xiàn)紅色。


在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,細(xì)胞代謝會(huì)產(chǎn)生酸性代謝產(chǎn)物,使培養(yǎng)基酸性增加,因此培養(yǎng)基會(huì)逐漸變黃。當(dāng)培養(yǎng)基解凍后,酸性代謝產(chǎn)物逐漸消耗,培養(yǎng)基的酸性減少,導(dǎo)致酚紅顏色逐漸變回紅色。


如果凍結(jié)的液體是水或緩沖液,一般不會(huì)出現(xiàn)顏色的變化。這是因?yàn)樗途彌_液不含有酸堿指示劑,所以當(dāng)其凍結(jié)和解凍時(shí),顏色不會(huì)發(fā)生變化。


2

為什么細(xì)胞培養(yǎng)基冷凍以后,會(huì)變酸呢?


細(xì)胞培養(yǎng)基凍結(jié)后變酸的原因是由于冰凍過(guò)程中,液體中的二氧化碳和其他氣體會(huì)逸出。冰結(jié)過(guò)程中,水分子會(huì)有序排列形成晶體,氣體無(wú)法溶解在冰中,因此逸出。培養(yǎng)基中二氧化碳的減少會(huì)導(dǎo)致酸堿度的變化,使培養(yǎng)基變酸,從而導(dǎo)致培養(yǎng)基的顏色變黃。


3


培養(yǎng)箱的CO2濃度為什么要設(shè)置5%?


培養(yǎng)箱的CO2濃度設(shè)置為5%是為了模擬細(xì)胞/組織在生物體內(nèi)的生長(zhǎng)環(huán)境,并提供適合細(xì)胞體外培養(yǎng)的條件。培養(yǎng)箱要求穩(wěn)定的溫度、CO2水平、酸堿度和濕度,其中CO2濃度的穩(wěn)定性對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)非常重要。


以常用的細(xì)胞培養(yǎng)基DMEM為例,其碳酸氫鈉濃度為1.5g/L。廠家已經(jīng)測(cè)試好對(duì)應(yīng)的培養(yǎng)箱濃度在5%左右,假如該培養(yǎng)基碳酸氫鈉濃度變?yōu)?g/L,則培養(yǎng)箱CO2濃度應(yīng)維持在10%。


國(guó)外常用的培養(yǎng)條件就是,1升培養(yǎng)基里含3克NaCO3,CO2培養(yǎng)箱的濃度是10%。而國(guó)內(nèi)大多數(shù)是5%的濃度,相對(duì)應(yīng)的培養(yǎng)基內(nèi)碳酸氫鈉濃度就在1.5g/L左右。



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